技術(shù)文章
Technical articles1.迅速滅活內(nèi)源的RNA酶,以防止RNA降解。以下3個方法均可有效使內(nèi)源RNA酶失活:1)用含離液(如胍鹽)的細(xì)胞裂解液收獲樣品,并立即勻漿。2)用液氮瞬間凍結(jié)樣品。值得特別注意的是:組織塊足夠小,在浸入液氮的瞬間就能凍結(jié),以瞬間令RNA酶失活。3)立即將樣品置于RNAfixer無液氮RNA樣品儲存液中。它是一種水相、無毒的收集試劑,能立即穩(wěn)定并保護(hù)完整、未凍結(jié)的組織和細(xì)胞樣品中的RNA。關(guān)鍵要點(diǎn)是組織樣品切片要夠薄(),這樣RNAfixer才能在RNase破壞RNA之前迅速...
Elisa試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA)、已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結(jié)合的酶結(jié)合物,然后加入底物A、B,和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guān)系。Elisa試劑盒試驗過程中需要特別注意的細(xì)節(jié)1、試劑準(zhǔn)備:試劑都在使用前達(dá)到室溫,使用后請立即按照說明書要求保存。實驗操作中使用一次性吸頭,避免交叉污染;2.加樣:加樣時,...
血清的保存應(yīng)該注意以下幾點(diǎn):(1)生物學(xué)實驗中需要長期保存的血清儲存于-20℃-70℃低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月。由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,預(yù)留體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂。(2)熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已解凍的血清。生物學(xué)實驗中加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻。此熱處理的目的是使血清中的補(bǔ)體成分(complement)滅活。除非,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)體...
一、成纖維細(xì)胞培養(yǎng)用人或動物胚體為好;動物可用小鼠或雞胚,去頭和內(nèi)臟,剪成小碎塊后,用胰蛋白酶消化法培養(yǎng);如為人胚,可取皮膚培養(yǎng)。幼兒包皮是培養(yǎng)成纖維細(xì)胞的很好對象。二、巨噬細(xì)胞培養(yǎng)1.實驗前三天,向每只小鼠腹腔內(nèi)注入無菌硫羥乙酸肉湯1ml(勿注入腸內(nèi))。2.引頸殺死動物,手提鼠尾將全鼠浸入70%酒精中3~5秒。3.置動物于解剖臺上,用針頭固定四肢,雙手持鑷撕開皮膚拉向兩側(cè),暴露出腹膜,但勿傷及腹膜壁。4.再用70%酒精擦洗腹膜壁后,用注射器吸10mlEagle液注入腹腔中,...
一、動物交際實驗原理:動物交際實驗利用小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。二、動物交際實驗參數(shù)指標(biāo):活動距離、運(yùn)動速度、測試時間區(qū)域指標(biāo)各區(qū)域運(yùn)動路程、逗留時間、靜止時間各區(qū)域(左區(qū)域、右邊區(qū)域、中央?yún)^(qū)域)次進(jìn)入時間、進(jìn)入次數(shù)長訪問時間、短訪問時間、進(jìn)入前總路程、次離開時間特色指標(biāo)束縛鼠間的接觸次數(shù)、接觸持續(xù)時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。
細(xì)胞培養(yǎng)實驗的基本原理與技術(shù)細(xì)胞培養(yǎng)實驗可分為:體外培養(yǎng)、組織培養(yǎng)、細(xì)胞培養(yǎng)、器官培養(yǎng)。下面就這4種培養(yǎng)方式做一個簡單介紹。體外培養(yǎng):就是將活體結(jié)構(gòu)成分或活的個體從體內(nèi)或其寄生體內(nèi)取出,放在類似于體內(nèi)生存環(huán)境的體外環(huán)境中,讓其生長和發(fā)育的方法。組織培養(yǎng):是指從生物體內(nèi)取出活的組織在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。細(xì)胞培養(yǎng):是指將活細(xì)胞在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。器官培養(yǎng):是指從生物體內(nèi)取出的器官、器官的一部分或器官原基在體外進(jìn)行培養(yǎng)的方法。細(xì)胞培養(yǎng)實驗的基本原理與技術(shù)現(xiàn)代生物技術(shù)一般認(rèn)為包括基...
Elisa試劑盒是免疫診斷中的一項新技術(shù),現(xiàn)已成功地應(yīng)用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應(yīng)用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結(jié)果,認(rèn)為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點(diǎn)。不僅適用于臨床標(biāo)本的檢查,而且由于一天之內(nèi)可以檢查幾百甚至上千份標(biāo)本,因此,也適合于血清流行病學(xué)調(diào)查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學(xué)...
一、動物交際實驗用途用于檢測動物的自閉行為二、動物交際實驗原理:利用小鼠熟悉了環(huán)境后,檢測小鼠靠近位于實驗箱中裝有另一只陌生小鼠的金屬籠的時間,來判斷小鼠的社交能力。三、動物交際實驗參數(shù)指標(biāo):活動距離、運(yùn)動速度、測試時間區(qū)域指標(biāo)各區(qū)域運(yùn)動路程、逗留時間、靜止時間各區(qū)域(左區(qū)域、右邊區(qū)域、中央?yún)^(qū)域)次進(jìn)入時間、進(jìn)入次數(shù)長訪問時間、短訪問時間、進(jìn)入前總路程、次離開時間特色指標(biāo)束縛鼠間的接觸次數(shù)、接觸持續(xù)時間、次接觸時間、接近時間與束縛鼠間距離、與束縛鼠間小距離。